FUNDAMENTO
Los colorantes tipo Romanowsky están formados por Azul de Metileno y sus derivados oxidados, colorantes básicos, y el colorante ácido Eosina.
Los colorantes básicos se unen a los componentes ácidos de las células, ácidos nucleicos, gránulos en basófilos y proteínas ácidas que se tiñen de un color rojo púrpura más o menos intenso.
La Eosina se une a la hemoglobina, a los componentes básicos de las estructuras celulares y a los gránulos de los eosinófilos.
El balance entre el azul de metileno y sus derivados oxidados como la Eosina, proporciona una tonalidad más o menos azul y una mayor o menor intensidad en la coloración, que son característicos de cada tipo de colorante Giemsa, May-Grünwald o Wright.
Se utiliza para la tinción de células sanguíneas y de médula ósea, aunque algunos autores utilizan la coloración compuesta de May-Grúnwald Giemsa para la tinción de parásitos en sangre.
Material necesario:
- Probeta
- Pipeta pasteur
- Pipeta de 10 mL
- Paralelas
- Cubeta de tinción
- Microscopio
Reactivos:
- May- Grünwald (compuesto por eosina y azul de metileno en metanol).
- Giemsa (diluido 1/10)
Muestra:
- Extensión de sangre que previamente realizamos en la práctica anterior
PROCEDIMIENTO:
1. Dilución del giemsa
Nuestro grupo realizó la dilución del giemsa al 1/10, para ello lo que hicimos fue echar hasta cerca de la línea de enrase de la probeta solución salina, y cuando quedó poco enrasamos con ayuda de una pipeta Pasteur, colocándonos con la línea de enrase a la altura de los ojos.
Tras ello cogemos una pipeta de 10 mL y cogemos 10 mL de giemsa y lo vertimos en la probeta, homogeneizando después.
Luego lo guardamos en un frasco con gotero.
2. Tinción
La extensión, previamente hecha, se puso sobre unas paralelas y se cubre con 2 mL aproximadamente de May-Grünwald y se deja durante 3 minutos.
Luego vertimos el colorante inclinando el portaobjetos y seguidamente, sin lavar los cubrimos con el Giemsa diluido que acababamos de preparar.
Lo dejamos durante 15 minutos y lo lavamos con solución salina, dejándolo secar al aire
OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA
 |
| 100x se observan neutrófilos y linfocitos |
ESQUEMA DEL PROCESO:
No hay comentarios:
Publicar un comentario