martes, 25 de febrero de 2020

PRÁCTICA 21: TBIC

24.02.2020 PRINCIPIO DEL MÉTODO  
La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe3+ y el exceso no fijado se elimina por precipitación con carbonato magnésico, determinándose a continuación la cantidad total de hierro presente. La diferencia entre la capacidad de fijación total de hierro hallada (CFTH) y el hierro sérico inicial (Hb) nos da la capacidad de fijación de hierro no saturado o residual.  
SIGNIFICADO CLÍNICO 
El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos.  El hierro se controla, normalmente, junto con la capacidad de fijación total del hierro (CFTH), y nos indica la capacidad de unión sérica disponible. Encontramos niveles altos de CFTH en la anemia ferropénica. Niveles bajos en hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de
laboratorio. 
REACTIVOS 
REACTIVOS ADICIONALES 
El sobrenadante obtenido se procesa como muestra para la determinación del hierro.

PREPARACIÓN  
Los reactivos están listos para su uso. 
 MATERIAL ADICIONAL  
  • Centrífuga
  • Espectrofotómetro
  • Gradillas
  • Tubos de ensayo
  • Micropipetas y puntas
MUESTRAS  
Suero o plasma heparinizado. Libre de hemólisis. 

PROCEDIMIENTO  
1. Pipetear en un tubo:
 
2. Mezclamos bien e incubar 10 minutos a Temperatura ambiente.
3. Añadir a cada tubo:
 
4. Mezclamos bien e incubar 10 minutos a temperatura ambiente. 
5. Centrifugar 15 min. a 3000 r.p.m. 




6. Recogimos el sobrenadante, cuidadosamente y procesamos como una muestra para la determinación de hierro.  



CÁLCULOS  


CFTH = Concentración de hierro en el sobrenadante x 3 ( Factor de dilución) 

VALORES DE REFERENCIA 
Suero o plasma:  200 – 400 μg/dL      36-72  mol/L 
Estos valores son orientativos. 
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia. 

 RESULTADOS
Absorbancia patrón: 0,097
Absorbancia muestra: 0,137
(0,137/0,097)X100X3 = 300 µg/dL Podemos observar que se encuentra dentro de los valores normales. ESQUEMA DEL PROCESO


No hay comentarios:

Publicar un comentario

PRÁCTICA 21: TBIC

24.02.2020 PRINCIPIO DEL MÉTODO    La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe3+ y el exceso no fijado se elimina por precipi...