02.12.19
OBJETIVO
El objetivo es investigar la presencia de Ac irregulares o incompletos en el suero del paciente enfrentándolos, primero a hematíes específicos tipados y luego a la AGH para su detección.
FUNDAMENTO
El Test de Coombs indirecto tiene como objetivo determinar la presencia de Ac libres presentes en el plasma.
Material necesario:
- Micropiipetas y puntas
- Pipeta pasteur
- Visualizador
- Baño termostatico
- Gradilla
- Tubos de ensayo
Reactivos:
- AGH y SF
- Hematñies tipados del grupo O+
Muestra:
- Suero problema
PROCEDIMIENTO
En primer lugar habría que preparar los hematíes tipados O+ pero esto ya lo hemos realizado en la anterior práctica. En donde se realiza una determinación de grupo celular sobre los hematíes tipados O+ para comprobarlo, se efectua el lavado y dilución de hematíes al 5% y se realiza el Coombs directo.
Por lo que pasamos directamente a la determinación de Coombs indirecto.
Para ello en un tubo de ensayo se depositan 3 gotas del suero problema (este suero nos lo aportó el profesor, ya que no queremos realizarlo con suero y hematíes de la misma persona).
Luego se añade a dicho tubo 3 gotas de la suspensión de hematíes tipados O+ al 5% y se agita de forma suave.
Luego se incuba en el baño unos 15 minutos pero nosotros lo hicimos en 5 minutos porque no daba tiempo porque se acababa nuestra hora de clase.
Se ava la mezcla con 1 mL de SSF, para ello centrifugamos 2500 rpm 1 minuto y quitamos el sobrenadante.
Al sedimento que obtenemos le dimos golpecitos en el fondo del tubo y vemos como había aglutinación, pero procedimos a verlo mejor en el visualizador.
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| Suero problema |
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| Añadiendo hematíes al suero |
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| Quitando sobrenadante |
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| Añadiendo AGH |
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