25.02.2020
PRINCIPIO DEL METODO
El hierro se disocia del complejo sérico hierro-transferrina en medio ácido débil. El hierro libre se reduce a ión ferroso mediante el ácido ascórbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forma un complejo coloreado:
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hierro en la muestra ensayada.
SIGNIFICADO CLINICO
El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos. Su déficit causa anemia ferropénica. Se encuentran niveles elevados de hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es común en poblaciones sanas.
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
Reactivo de trabajo (RT):
Disolvimos el contenido de un tubo de R 2 Reductor en un frasco de R 1 Tampón. Tapamos y mezclamos suavemente hasta disolver su contenido.
MATERIAL ADICIONAL
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Espectrofotómetro
- Micropipetas y puntas.
- Gradillas
- Tubo de ensayo.
MUESTRAS
Suero o plasma heparinizado. Libre de hemólisis. Separado lo antes posible de los hematies.
PROCEDIMIENTO
1. Ajustar la longitud de onda a 562 nm.
2. Pipetear en una cubeta:
3. Mezclamos e incubamos 10 min a temperatura ambiente.
4. Lemos las absorbancias (A) del Patrón y la muestra frente al Blanco de reactivo.
El color es estable como mínimo 30 minutos.
VALORES DE REFERENCIA
Hombres 65-175 μg/dL 11,6-31,3 mol/L
Mujeres 40-150 μg/dL 7,16-26,85 mol/L
RESULTADOS.
Absorbancia patrón: 0,091
Absorbancia muestra: 0,141
(0,141/0,091)X100 = 154,94 μg/dL
Desconocemos si la muestra es de un hombre o de una mujer.
En el caso de que sea de un hombre los valores se encuentran dentro de la normalidad, pero si se trata de una mujer son ligeramente altos
ESQUEMA DEL PROCESO
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