PRÁCTICA 19: TINCIÓN DE RETICULOCITOS

21.02.2020

OBJETIVO

Determinar RET por un número determinado de hematíes.

Calcular el número de reticulocitos existentes por volumen de sangre.

Valorar el RET, el número absoluto de reticulocitos y la actividad eritropoyética.

MATERIAL.

• Gradilla y tubo pequeño de ensayo y papel de parafilm.
• Tres pipetas de Pasteur desechables y 2 potaobjetos.
• Microscopio y aceite de inmersión.
• Lanceta.
• Alcohol.

REACTIVOS.

• Colorante de azul de cresil brillante

MUESTRA.

Sangre anticoagulada con citrato sódico.

PROCEDIMIENTO.

Colocamos en un tubo tres gotas pequeñas de solución de colorante con una pipeta Pasteur.

Añadimos tres gotas de la muestra sanguínea, para ello nos puncionamos el dedo con una lanceta y la cogemos con una micropipeta y se añade a la solución de colorante.

La mezcla siempre debe ser proporcional 1:1

Tapamos el tubo donde se ha realizado la mezcla con parafilm.

Mezclamos agitando el tubo suavemente para que los eritrocitos absorban bien el colorante.

Dejamos en reposo unos 20 minutos a temperatura ambiente.

Pasado ese tiempo volvimos a homogeneizar la suspensión.

Destapamos el tubo; con una gota de la mezcla, efectuamos una extensión sobre el portaobjetos con el método de cuña

Dejar secar la extensión al aire.

Colocamos la extensión bien seca sobre la platina del microscopio.

Con el objetivo de 40X localizamos una zona de la extensión en que los hematíes se observan bien separados.

Pasamos al objetivo de 100X y ajustamos la luminosidad para observar bien las células.

RESULTADOS

Tras un período de tiempo de búsqueda observamos varios reticulocitos, se observaron con la misma
apariencia que los eritrocitos pero con unas tenues granulaciones en su interior.

A las 6 se puede ver tenuemente un reticulocito.

ESQUEMA DEL PROCESO